بررسی ساختمان و عمل هموگلوبین ماهی (بنی sharpeyi barbus) و (شیربط barbus grypus)

چکیده: در این تحقیق به مطالعه عمل و ساختمان هموگلوبین های ماهی بنی و شیربت پرداخته شده است. هموگلوبین ماهی بنی و شیربت استخراج گردید. سپس توسط روش های مختلفی نظیر الکتروفورز، طیف سنجی مرئی-فرابنفش، دورنگ نمائی دورانی، گرما سنجی روبشی افتراقی مورد بررسی قرار گرفت. مطالعات الکتروفورز، حضور هموگلوبین های چندگانه را در ماهی بنی و شیربت نشان داد. مطالعات دورنگ نمائی دورانی، برای بررسی اثر دما بر هموگلوبین ماهی بنی انجام شد. دما از 25 درجه سانتی گراد تا 67 درجه سانتی گراد افزایش یافت. تغییرات کسری در درجه بیضوی در 222 نانومتر اندازه گیری شد. tc (دمای بحرانی) بین (4/63-51) درجه سانتی گراد به دست آمد. اثر غلظت 43/1 میلی مولار sds بر ساختار دوم هموگلوبین ماهی بنی و شیربت توسط روش دورنگ نمائی دورانی در ناحیه فرابنفش نزدیک انجام شد. آنالیز ساختار دوم کاهش در آلفا هلیکس و افزایش دیگر ساختارهای دوم را نشان داد. اثر غلظت 43/1 میلی مولار sds و دی تیونیت سدیم بر ساختار سوم هموگلوبین ماهی بنی و شیربت توسط روش دورنگ نمائی دورانی در ناحیه فرابنفش نزدیک انجام شد. این مطالعه نشان داد که ساختار سوم هموگلوبین در حضور غلظت 43/1 میلی مولار sds تخریب می شود و دی تیونیت سدیم باعث تبدیل اکسی هموگلوبین به داکسی هموگلوبین می شود. بررسی فعالیت پراکسیدازی هموگلوبین ماهی در دمای 25 درجه سانتی گراد دربازه غلظتی 1 میلی مولار تا 12 میلی مولار از سوبسترای پراکسید هیدروژن نشان داد که هموگلوبین دارای حداقل دو نوع جایگاه اتصال سوبسترای پر اکسید هیدروژن است که اتصال پر اکسید هیدروژن به هر یک از این جایگاه های تنظیمی وابسته به غلظت سوبسترا می باشد. مطالعات گرما سنجی روبشی افتراقی، tm هموگلوبین ماهی بنی را برابر با 68 درجه سانتی گراد نشان داد. همچنین ?h واکنش برابر با 7/78 کیلوکالری بر مول محاسبه گردید. tm به کمک روش روبش دمایی جذب 280 نانومتر توسط اسپکتروفوتومتری مرئی-فرابنفش برای هموگلوبین ماهی شیربت 68 درجه سانتی گراد به دست آمد. اثر دی تیونیت سدیم بر هموگلوبین ماهی بنی توسط روش طیف سنجی تیتراسیون مورد بررسی قرار گرفت. اثر sds بر اتواکسیداسیون هموگلوبین ماهی بنی و شیربت توسط اسپکتروفوتومتری مطالعه شد. این مطالعات نشان داد که sds، داکسی و مت هموگلوبین را افزایش می دهد و باعث کاهش اکسی هموگلوبین می شود. بنابراین sds فرآیند اتواکسیداسیون را افزایش می دهد که می تواند مربوط به ساختار هموگلوبین ماهی مربوط باشد.